不含酚紅的 TrypLE Express 酶憑借性質,在細胞培養長期過程中從多方面產生影響。我將從細胞生長、功能維持、實驗準確性等角度,分析它對細胞培養的長期作用。
維持細胞生長特性:不含酚紅的 TrypLE Express 酶具有非動物源性和溫和的細胞作用特性,這對細胞培養的長期影響至關重要。傳統動物源性胰蛋白酶可能引入病原體或異源蛋白,干擾細胞正常生長代謝,長期使用會導致細胞生長速率改變、形態異常等問題。而 TrypLE Express 酶避免了這些風險,在多次傳代過程中,能持續為細胞提供穩定生長環境。在干細胞培養中,長期使用該酶解離細胞,干細胞的自我更新和多向分化潛能不會因酶的作用而受損,保持細胞正常的增殖速率和形態,確保細胞培養的連續性和穩定性 。
保護細胞功能和表面標志物:細胞表面標志物是細胞功能和狀態的重要體現,在細胞培養長期研究中意義重大。TrypLE Express 酶特異性裂解賴氨酸和精氨酸 C - 末端的肽鍵,成分均一、純度高,對細胞作用溫和。以免疫細胞培養為例,在長期培養過程中,若使用傳統胰蛋白酶,會破壞細胞表面抗原決定簇,影響免疫細胞功能和后續免疫檢測準確性。而使用不含酚紅的 TrypLE Express 酶,細胞表面標志物如 CD 分子等得以完整保留,細胞的免疫功能不會受到影響,在長期免疫細胞研究和免疫治療相關細胞制備中,能準確反映細胞真實狀態,為實驗提供可靠數據 。
減少實驗干擾因素:不含酚紅的特性在細胞培養長期實驗中也發揮著積極作用。酚紅作為 pH 指示劑,可能與某些細胞表面受體結合,影響細胞生理功能,干擾實驗結果。在長期細胞培養實驗中,如細胞代謝研究、藥物篩選實驗,酚紅可能與藥物發生相互作用,改變藥物效果評價。而不含酚紅的 TrypLE Express 酶消除了這一干擾因素,使實驗結果更真實反映細胞對藥物的反應,確保實驗數據準確性和可靠性。此外,該酶無需血清或抑制劑終止反應,適用于無血清培養體系,減少血清成分帶來的不確定性,為長期細胞培養實驗提供更穩定的條件 。
保障實驗可重復性:從實驗操作角度,不含酚紅的 TrypLE Express 酶操作便捷且儲存穩定,這對細胞培養長期實驗的可重復性意義重大。其可直接替換胰蛋白酶,無需復雜優化,降低操作差異導致的實驗誤差。寬泛的儲存條件讓科研人員隨時獲取穩定活性的試劑,避免因試劑批次、儲存條件差異影響細胞解離效果和培養結果。在多中心、長時間的細胞培養研究項目中,這種穩定性和便捷性保證了不同實驗室、不同時間段的實驗結果具有可比性,提高實驗可重復性 。