內(nèi)容簡介：
TrypLE™ Express酶（1X）不含酚紅是一種非動(dòng)物源性重組胰蛋白酶替代物，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞解離和傳代培養(yǎng)。相較于傳統(tǒng)胰蛋白酶，其成分明確、穩(wěn)定性高，且不含酚紅，避免了光學(xué)檢測中的干擾，尤其適用于高靈敏度實(shí)驗(yàn)如流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微成像。本文綜述了TrypLE™ Express酶（1X）無酚紅的技術(shù)原理、性能優(yōu)勢及在干細(xì)胞、原代細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵應(yīng)用，并探討了其標(biāo)準(zhǔn)化操作對實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性的影響。

關(guān)鍵詞：
TrypLE™ Express、無酚紅、細(xì)胞解離、非動(dòng)物源性、重組胰蛋白酶

正文：
在生物醫(yī)藥和細(xì)胞生物學(xué)研究中，細(xì)胞解離技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化與安全性日益受到重視。TrypLE™ Express酶（1X）不含酚紅作為一款創(chuàng)新的重組胰蛋白酶替代物，通過基因工程表達(dá)的重組蛋白酶（主要為胰蛋白酶類似物）實(shí)現(xiàn)高效細(xì)胞解離，同時(shí)避免了動(dòng)物源性成分（如豬源胰蛋白酶）帶來的批間差異和病原體風(fēng)險(xiǎn)。

技術(shù)優(yōu)勢分析

1. 無酚紅設(shè)計(jì)：酚紅的去除消除了其在吸光度檢測（如ELISA）或熒光實(shí)驗(yàn)中的背景干擾，尤其適用于CRISPR編輯細(xì)胞篩選等高通量檢測。

2. 溫和解離特性：其優(yōu)化的pH緩沖體系（含EDTA）可減少細(xì)胞膜損傷，提升原代細(xì)胞和干細(xì)胞的存活率（文獻(xiàn)報(bào)道可達(dá)>90%）。

3. 穩(wěn)定性與兼容性：室溫下活性保持穩(wěn)定，且與血清培養(yǎng)基直接中和，簡化了操作流程。

應(yīng)用場景拓展

• 類器官培養(yǎng)：無酚紅配方避免了對類器官形態(tài)學(xué)分析的干擾。

• GMP生產(chǎn)：符合藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)（如USP-NF），支持臨床級細(xì)胞治療產(chǎn)品的開發(fā)。

行業(yè)趨勢
隨著監(jiān)管機(jī)構(gòu)對動(dòng)物源性試劑限制的加強(qiáng)（如EMA指南），TrypLE™ Express等合成酶制劑的市場需求將持續(xù)增長。未來，其與微流控芯片或自動(dòng)化培養(yǎng)系統(tǒng)的整合或成為技術(shù)突破點(diǎn)。