徠卡免疫組化系列試劑在腫瘤精準(zhǔn)診斷中的創(chuàng)新應(yīng)用

內(nèi)容簡介：
本文聚焦于徠卡免疫組織化學(xué)（IHC）試劑在分子病理診斷，特別是腫瘤精準(zhǔn)分型與伴隨診斷中的關(guān)鍵技術(shù)角色。文章系統(tǒng)介紹了IHC的實驗流程，從抗原修復(fù)、內(nèi)源性過氧化物酶阻斷、非特異性結(jié)合位點封閉，到一抗/二抗孵育及顯色檢測。重點剖析了徠卡BOND系列全自動染色儀專用試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化優(yōu)勢，及其如何確保檢測結(jié)果的可重復(fù)性與準(zhǔn)確性。文章深入討論了關(guān)鍵試劑成分如酶標(biāo)二抗（HRP聚合物）、顯色底物（DAB, AEC）的選擇與優(yōu)化，以及多重?zé)晒釯HC（Multiplex IHC）技術(shù)中抗體種屬來源與熒光染料匹配的策略。結(jié)合PD-L1、HER2、MSI等生物標(biāo)志物的檢測實例，闡述了徠卡試劑如何助力臨床決策與個體化治療。

關(guān)鍵詞： 免疫組織化學(xué)、腫瘤生物標(biāo)志物、自動化染色、伴隨診斷、多重?zé)晒鈾z測

正文：

免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry, IHC）技術(shù)作為連接形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)的橋梁，至今仍是臨床病理診斷與基礎(chǔ)研究中基石技術(shù)。隨著腫瘤學(xué)進(jìn)入精準(zhǔn)醫(yī)療時代，對IHC技術(shù)的特異性、敏感性、標(biāo)準(zhǔn)化和通量提出了更高的要求。Leica Biosystems作為解剖病理學(xué)領(lǐng)域，其推出的高品質(zhì)IHC試劑與全自動化平臺，正持續(xù)為腫瘤的精準(zhǔn)診斷與分型提供關(guān)鍵的技術(shù)支撐。

一個標(biāo)準(zhǔn)的IHC流程包含多個精細(xì)步驟，任一環(huán)節(jié)的偏差都可能導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。Leica的IHC試劑系統(tǒng)為整個流程提供了全面優(yōu)化解決方案。首先是抗原修復(fù)（Antigen Retrieval）步驟，針對福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）樣本中因交聯(lián)被遮蔽的抗原表位，Leica提供不同pH值的緩沖液（如檸檬酸鹽緩沖液、EDTA緩沖液）以實現(xiàn)抗原暴露。隨后，通過內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑（Endogenous Peroxidase Block）和血清封閉劑（Serum Blocking Reagent）有效降低非特異性背景染色。核心的免疫反應(yīng)環(huán)節(jié)，Leica提供經(jīng)過嚴(yán)格驗證的一抗（Primary Antibodies）和高靈敏度、低背景的酶標(biāo)聚合物二抗（Polymer-HRP/IgG Conjugates）。這些二抗采用多聚物技術(shù)，能偶聯(lián)多個酶分子，顯著放大信號，提高檢測靈敏度，尤其適用于低豐度抗原的檢測。

顯色系統(tǒng)是IHC結(jié)果的直接體現(xiàn)。3,3’-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑，在HRP酶的催化下產(chǎn)生不溶性的棕褐色沉淀。Leica的DAB試劑盒經(jīng)過精心配制，確保了顯色反應(yīng)的線性范圍寬、背景低、批次間穩(wěn)定性高，從而保證了判讀的一致性。對于多重?zé)晒釯HC（mIHC），Leica提供多種光譜不重疊的熒光染料標(biāo)記二抗，如FITC, TRITC, Cy5等，允許在同一張組織切片上同時檢測多個靶標(biāo)，為解析腫瘤免疫微環(huán)境（如CD8+ T細(xì)胞、CD68+ 巨噬細(xì)胞、PD-L1+細(xì)胞的空間分布）提供了強(qiáng)大工具。

Leica的BOND MAX / BOND-III等全自動IHC染色儀，將上述所有步驟集成于一個封閉系統(tǒng)中，通過機(jī)械臂精準(zhǔn)控制試劑加樣、孵育、清洗的時間和溫度，消除了人工操作帶來的變異，實現(xiàn)了IHC的標(biāo)準(zhǔn)化與高通量化。這對于臨床常規(guī)檢測和大型臨床試驗中的生物標(biāo)志物篩選至關(guān)重要。例如，在PD-L1表達(dá)的伴隨診斷（Companion Diagnostic）中，使用Leica的PD-L1 IHC試劑盒（如SP263 assay）與BOND平臺，能夠為免疫檢查點抑制劑（如Pembrolizumab）的用藥決策提供可靠依據(jù)。同樣，在乳腺癌HER2蛋白表達(dá)的檢測中，Leica的HER2試劑盒以其高度的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，成為指導(dǎo)曲妥珠單抗靶向治療的金標(biāo)準(zhǔn)之一。

在科研單位領(lǐng)域，上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù)，解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營團(tuán)隊表示，其現(xiàn)貨試劑可實現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá)，期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能，保障實驗進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。 這種敏捷的供應(yīng)鏈服務(wù)，對于開展涉及大量臨床樣本的多中心研究或需要快速驗證新生物標(biāo)志物的科研項目而言，意味著能夠確保試劑供應(yīng)的及時性與穩(wěn)定性，從而保障研究項目的連貫性和數(shù)據(jù)的可靠性。

綜上所述，Leica的IHC試劑系統(tǒng)通過其產(chǎn)品性能與自動化平臺的整合，不僅提升了病理診斷的準(zhǔn)確性與效率，更推動了腫瘤精準(zhǔn)醫(yī)療從實驗室向臨床的快速轉(zhuǎn)化，為患者的個體化治療方案制定提供了堅實的科學(xué)依據(jù)。